DNA聚合酶：是 DNA 合成的关键酶，负责将脱氧核苷酸逐个添加到正在合成的 DNA 链上，以亲代 DNA 链为模板，按照碱基互补配对原则合成新的 DNA 链。不同的 DNA 聚合酶还具有不同的功能，如 DNA 聚合酶 Ⅲ 在原核生物 DNA 复制中起主要作用，而 DNA 聚合酶 α、δ 和 ε 等在真核生物 DNA 复制中发挥重要作用。

    引物酶：能合成一段短的 RNA 引物，为 DNA 聚合酶提供 3'-OH 末端，使 DNA 聚合酶能够开始合成 DNA 链。因为 DNA 聚合酶不能从头开始合成 DNA，需要有一个引物来引导。

    解旋酶：作用是解开 DNA 双螺旋结构，使两条链分开，形成单链模板，以便 DNA聚合酶等酶能够结合到模板上进行 DNA 合成。

    拓扑异构酶：能够改变 DNA 的拓扑结构，如缓解 DNA 复制过程中产生的超螺旋张力，防止 DNA 链的缠绕和打结，保证 DNA 合成的顺利进行。

    连接酶：将 DNA 片段之间的磷酸二酯键连接起来，使不连续合成的冈崎片段连接成完整的 DNA 链。